合成多肽分离纯化的新思路

PD-1的竞争热潮已然褪去，GLP-1带给行业的震动貌似比PD-1更大。

GLP-1类药已获批适应症为糖尿病、肥胖等慢性病，患者需要长期用药。按照14mg口服剂量来算，每位患者每年要摄入约5g，中国糖尿病患者超过1亿，假使十分之一患者服用，年需求量就超过50吨。

上半年中国市场GLP-1RA市场规模约为46亿元；年上半年，司美格鲁肽销售额92亿美元，替尔泊肽销售额15.5亿美元。来自辉瑞的预测数据，到年美国GLP-1RA用于糖尿病的市场规模将达-亿美元，用于减重的市场规模将达-亿美元，总体市场规模预计超过亿美元。

GLP-1属于多肽类药物。

多肽合成多肽

多肽是指由多个（通常由10~个）氨基酸通过肽键链接而合成的一类化合物，连接方式与蛋白质相同，相对分子量为~00。通常低于个氨基酸组成的肽称为多肽，更大的多肽因空间结构对活性的决定性作用而称为蛋白质。

其制备方式主要有从动植物中提取、化学合成、基因重组三种。

合成多肽主要应用于药物领域和化妆品领域等。常见的合成多肽原料药如胸腺五肽、谷胱甘肽、胸腺法新、奥曲肽、生长抑素和亮丙瑞林等。应用于化妆品添加的多肽如铜胜肽、乙酰四肽-5、乙酰基六肽-3、棕榈酰四肽-7和棕榈酰五肽-3等。

多肽合成中的纯度问题

多肽合成主要是生物合成和化学合成两种。其工艺路线主要包括有机合成、水解、色谱纯化、转盐，最后获得正确盐形式的高纯度产品。

由于固相合成多肽涉及的底物原料种类多，涉及20种氨基酸的保护态；合成步骤多，每延长一个氨基酸涉及两次反应；合成条件苛刻（如水解），因此最终拿到的粗品纯度很低（20%~40%不等），盐含量高，且关键杂质多（水解、脱氨杂质等）。

多肽纯化新方法

传统的多肽合成工艺中，固相合成树脂水解下来的粗品先以大粒径反相硅胶（30-μm）进行粗纯，但是由于粗品盐含量高，样品在反相硅胶的保留会大打折扣，导致制备上样量低，制备峰型变形，纯度提升效果差。

我们针对多肽合成中遇到的问题，优化工艺，选用“PolyGel系列高分辨率离子交换层析介质”捕获合成肽粗品，可通过使用%水相流动相稀释样品，使其大量上样而不流穿，且通过梯度洗脱达到较好的纯化效果。

PolyGel15PolyGel30高分辨率离子交换层析介质

PolyGel系列层析介质是科诺赛推出的单分散PS-DVB（聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物）基质的高分辨率离子交换层析介质。

其中PolyGel30可用于蛋白和多肽的中间纯化，PolyGel15可用于精纯。

其中PolyGel15在蓝铜胜肽的纯化中，可直接满足其高纯度的纯化需求。

此方案基本不使用有机溶剂，流动相成本最低，填料寿命长，设备采用中低压，成本最低，适用于工业化生产。

PolyGel15PolyGel30特点

以聚合物PS-DVB(聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物)为基质，该基质经过表面亲水改性后再键合离子交换基团，非特异性吸附低，机械强度高；

具备对生物活性大分子良好的生物相容性和物化稳定性，极大地提高了纯化效率；

该系列产品具有极高分辨率，适用于研究和工业应用中的精纯步骤，比如抗体、蛋白、多肽、核酸和小分子药的精纯。